מטרות הקורס:
היכרות עם תהליכים בהנדסה גנטית המשמשים כלי בייצור הביוטכנולוגי.
תיאור הקורס:
- שיטות לבידוד מולקולות של DNA אנזימי רסטריקציה;
- מפות רסטריקציה – חיתוך כפול חיתוך חלקי, סימון פראגמנט מכיל אתר רסטריקציה;
- שיטות סימון: רדיואקטיבי, פלואורוצנטי וקביעת רצף נוקלאוטידים;
- שיטות הברידיזציה ואלקטרופורזה; אסטרטגיות שיבוט – ספריות גנים, שיבוט ע"י cDNA, שיבוט ע"י קוסמידים (Cosmids)
- Very-Large-Insert Bacterial Vector Systems for human genomic DNA ;
- נגיפים (Bacteriophage vectors , M13) ;
- שיטות חיפוש וזיהוי גנים שתוצריהם ידועים ולא ידועים (Finding genes) ;
- שיטות להחדרת גנים לתאים: טרנספורמציה, טרנספקציה, טרנסדוקציה, קוניוגציה, איחוי ממברנות, מיקרו-הזרקה;
- סלקציה באמצעות סמנים גנטיים;
- נשאי ביטוי (Expression vectors), ביטוי גנים זרים בתאים ברמת ה-RNA וברמת חלבון;
- PCR, Real-Time PCR ואופני השימוש בהם; Deep sequencing
- Microarrays ; מוטציות מכוונות; תאים אנימאליים, עכברים טרנסגנים;
- החדרת גנים לתאי ה- Germ line וביטויים ;
- זיהוי אתרים פולימורפים בגנים ודאגנוסטיקה גנטית; שיטות רפוי ע"י החדרת גנים (Gene therapy).
